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X-Gal是β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）的显色底物，在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。基于这个特点，当pUC系列载体DNA以lacZ缺欠细胞作为宿主进行转化时，或M13噬菌体载体DNA进行转染时，如果在培养基中加入X-Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色而方便地挑选择出基因重组体。X-Gal常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。

中文名称	5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷
英文名称	5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside
CAS号	7240-90-6
分子式	C14H15BrClNO6
分子量	408.63g/mol
外观	白色至浅黄色粉末
纯度	＞99%
溶解性	溶于DMSO，溶解度可达20mg/mL。也溶于DMF。
结构式

• 含有X-Gal的培养基4℃避光保存，须在1周内使用。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 本制品仅作科研用途。

• 配制储存液
  称取200mg X-Gal于15mL离心管，向其中加入10mL DMF，旋涡震荡使其充分溶解后于-20℃避光保存，正确操作下，有效期可达5～12个月，如小量频繁使用，建议分装成1mL/管后避光冻存。
  
• 蓝白斑筛选
  
  • X-Gal、IPTG加入琼脂培养基溶液
    
    • 高压灭菌已加琼脂的培养基，并冷却到50℃左右。
      
    • 每毫升培养基内加入10μL 20mg/mL X-gal溶液、10μL 0.1M的IPTG（使其终浓度达到1mM）；
      
    • 加入适量抗生素；
      
    • 混匀后按照平板大小倒入适量培养基，待培养基冷却至室温后，接种细菌于37℃过夜培养。
  • X-Gal、IPTG加到琼脂平板表面
    
    • 于无菌超净工作台制备平板（如LB琼脂板）；
      
    • 取40μL 100mM IPTG和120μL 20mg/mL X-gal混合，均匀地涂布于准备好的平板上；
      注：平板边缘较难充分涂布均匀，容易产生假阳性，因此，为了得到更好结果，建议后续操作中尽可能在平板中间挑取单克隆。
      
    • 37℃孵育直至所有液体被吸收（30min或更长）。接种细菌于37℃过夜培养。